Ham's F-12 Nährstoffmischung

Ham 's F - 12 als Grundlage der serumfreien Kulturkultur, oft unter dem geringen Serumgehalt, besonders geeignet für die Einzelzellkultivierung und Klonierung, nach Zugabe von Serum auch in Krebszellen und der Kultivierung der Primärzelle weit verbreitet, wie Rattenleberzellen, Rattenprostataepithelzellen, Knorpelzellen, Rattenmyoblasten, Hühnerembryozellen usw. Außerdem war das DMEM/F12-Kulturmedium, das durch Mischen von Ham's F-12 mit gleichem Volumen DMEM erhalten wurde, nahrhafter und weit verbreiteter Gebraucht.

Zutaten der F-12-Nährstoffmischung von Ham

L-Glutamin (Glutamin)

L-Glutamin (Glutamin) ist ein essentielles Nährstoffelement in der Zellkultur, aber es ist in Lösung instabil und wird spontan abgebaut. Die Menge an L-Glutamin kann gemäß den Forschungsanforderungen des Mediums ohne L-Glutamin beliebig angepasst werden, und die Zugabe von frischem L-Glutamin oder seinen Ersatzstoffen zum Zeitpunkt der Verwendung ist für das Zellwachstum vorteilhafter.

L-Alanyl-L-Glutamin (Ala-Glu), auch bekannt als Alanyl-Glutamin und Alanyl-Glutamyl-Dipeptid, ist ein fortschrittlicher Zellkulturzusatz, der L-Glutamin im Zellkulturmedium direkt ersetzen kann. L-Glutamin ist ein essentieller Nährstoff in der Zellkultur, aber es ist in Lösung instabil und wird es in Lösung instabil und wird spontan abgebaut, um Ammoniak und Pyroglutaminsäure zu produzieren, von denen Ammoniak für Zellen schädlich ist, wohingegen L-Alanyl- L-Glutamin ist in wässriger Lösung sehr stabil und wird nicht spontan abgebaut. Der Mechanismus der zellulären Verwertung besteht darin, dass die Zellen während der Zellkultur allmählich eine Peptidase in das Kulturmedium freisetzen, um L-Alanyl-L-Glutamyl zu L-Alanin und L-Glutamin zu hydrolysieren, und dann werden die Zellen diese beiden Hydrolysen aufnehmen und nutzen Produkte. Der Prozess der zellulären Verwertung von L-Alanyl-L-Glutamyl ähnelt der Flow-Addition-Kulturstrategie, da dem Kulturmedium kontinuierlich geringe Mengen an L-Glutamin zugesetzt werden, wodurch die Verwertung von L-Glutamin erhöht wird, ohne einen Überschuss zu erzeugen Ammoniak, das dem Zellwachstum förderlicher ist. L-Alanyl-L-Glutamyl kann äquimolares L-Glutamin ersetzen, ist für alle Zellen geeignet, erfordert wenig Anpassung und kann die Zellkulturzeit verlängern. Es kann auch die Zellkulturzeit verlängern und die Anzahl der Passagen reduzieren, was Zeit und Geld spart. Zellen, die in mit L-Glutamin ergänztem Medium kultiviert wurden, zeigten eine langsamere Verringerung der Aktivität als diejenigen, die in einem mit L-Glutamin ergänzten Medium kultiviert wurden. Die etwas längere Verzögerungszeit ist auf die Zeit zurückzuführen, die für die Freisetzung von Peptidase und den Verdau des Dipeptids erforderlich ist.

HEPES

HEPES ist ein ausgezeichneter biologischer Puffer, der keine toxische Wirkung auf Zellen hat. Das Medium mit HEPES kann einen konstanten pH-Bereich über einen längeren Zeitraum aufrechterhalten, wodurch wirksam verhindert werden kann, dass das Zellwachstum durch große pH-Schwankungen des Kulturmediums beeinträchtigt wird. Es kann in CO2-freien Inkubatoren verwendet werden.

Penicillin-Streptomycin-Lösung

Die Penicillin-Streptomycin-Lösung, allgemein auch als „duales Antibiotikum“ bezeichnet, ist die am häufigsten verwendete antibiotische In-vitro-Kultur zur Verhinderung einer mikrobiellen Kontamination, bei der Penicillin in die bakterielle Zellwandsynthese eingreift und dabei besonders wirksam gegen grampositive Bakterien ist Streptomycin hemmt die bakterielle Proteinsynthese durch Bindung an die 30S-Untereinheit des bakteriellen Ribosoms und ist besonders wirksam gegen Streptomycin bindet an die 30S-Untereinheit des bakteriellen Ribosoms und hemmt die bakterielle Proteinsynthese, was sowohl gegen gramnegative als auch grampositive Bakterien wirksam ist, ist aber besonders wirksam gegen gramnegative Bakterien. Die Kombination von Penicillin und Streptomycin kann die meisten bakteriellen Kontaminationen verhindern.

Dieses Produkt enthält Aminosäuren, Vitamine, anorganische Salze und viele andere Komponenten, die für die Multikultur von Zellen erforderlich sind, enthält jedoch keine Proteine, Lipide oder Wachstumsfaktoren, daher sollte das Produkt mit Serum oder serumfreien Zusätzen verwendet werden.

Vorsichtshinweise zur F-12-Nährstoffmischung von Ham

• Dieses Produkt wurde filtriert und debakteriiert und sollte im aseptischen Betrieb mit Vorsicht verwendet werden, um eine Kontamination zu vermeiden.
• Frieren Sie das Produkt nicht ein und tauen Sie es nicht ein, um die optimale Nutzung des Produkts zu gewährleisten.
• Dieses Produkt ist nur für die wissenschaftliche Forschung oder weitere Studienzwecke bestimmt, nicht für die Diagnose oder Behandlung.