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Was ist die Flüssigkeit im Virustransportmedium? Warum ist es rot?

Der Nukleinsäuretest ist, wie der Name schon sagt, die Sammlung von Nukleinsäuren (unter Verwendung von Nasen- oder Oropharynxabstrichen) und die anschließende Amplifikation durch PCR, um das Vorhandensein einer Zielsequenz nachzuweisen, um festzustellen, ob eine Spezies vorhanden ist. Seit dem Ausbruch von Covid-19 rückt diese Technologie nach und nach in den Blickpunkt der Öffentlichkeit.

Nach der Entnahme der biologischen Probe muss unbedingt sichergestellt werden, dass die Nukleinsäure intakt erhalten bleibt. Wie Bakterien können abgeblätterte Zellen und andere sekretorische Komponenten jedoch Wirkstoffe aufweisen, die die Nucleinsäurespaltung katalysieren. Insbesondere das genetische Material von Covid-19 ist RNA, die schwächer als DNA und leichter zu lysieren ist.

Daher hat das virale Transportmedium (VTM) nur eine Aufgabe – das genetische Material in der Testprobe intakt zu halten. Je nachdem, ob es deaktiviert ist, kann es in zwei Transportmedien unterteilt werden.

Inaktiviertes Transportmedium

Die einfachste Methode besteht darin, alle Viren und Zellen abzutöten und alle potenziellen RNA-Hydrolasen zu hemmen. Beispielsweise werden Tenside/Lysesalze verwendet, um die Membranstruktur von Viren/Zellen zu zerstören, so dass virale Proteine ​​ihre physiologische Aktivität verlieren. Die Enzyme werden mit Guanidinsalzen (z. B. Guanidinisothiocyanat) zum Schutz der Nukleinsäure gehemmt, ähnlich dem Nukleinsäure-Extraktionslysat (TRIzol-Reagenz). Es wird häufig für biologische Routinetests verwendet, um das Risiko einer Aerosolinfektion durch übertragbare Viren zu vermeiden.

Guanidinfreier Lyse-Inaktivierungstyp: Ein Nicht-Guanidinsalz-Protein-Denaturierungsmittel wird hinzugefügt, das das Virus lysiert, um es zu inaktivieren und Nukleinsäuren in die Lösung freizusetzen. Es ist keine Nukleinsäureextraktion erforderlich, geeignet für die direkte PCR-Amplifikation (aber seine Löslichkeit und Denaturierungskapazität ist im Vergleich zu Guanidinsalzen relativ schwach).

Nicht inaktiviertes Transportmedium

Nicht-inaktivierende Transportmedien bestehen aus organischen Lösungsmitteln und inerten Materialien, die darauf ausgelegt sind, die Lebensfähigkeit von klinischen Proben, die Viren enthalten, aufrechtzuerhalten. Sie unterdrücken eine mikrobielle Kontamination und schützen die Proben während des Transports und der Verarbeitung. Die Hauptkomponenten eines inaktivierten viralen Transportmediums sind basale Hank's ausgewogene Salzlösung. Amphotericin B wird hinzugefügt, um konkurrierende Bakterien und Hefen zu hemmen. Der HEPES-Puffer wird verwendet, um den richtigen pH-Wert aufrechtzuerhalten.

Personenschutz sollte Vorrang haben, da das nicht-inaktivierende VTM lebensfähige Viren/Bakterien enthält. Es besteht die Gefahr, dass sich der Forscher ansteckt. Gleichzeitig ist für eine effiziente Konservierung ein kostspieliger Kühlkettentransport erforderlich. Es kann zur Virusisolierung, Kultivierung und Entwicklung von Impfstoffen verwendet werden.

Zusammenfassung

Obwohl die beiden Transportmedien ähnlichen Zwecken dienen, gibt es dennoch einige grundlegende Unterschiede. Während nicht-inaktiviertes VTM die Lebensfähigkeit von Zellen/Viren stabilisiert und die bakterielle Vermehrung verhindert, schützt inaktiviertes VTM Nukleinsäuren vor Viren und Zellkrankheiten.

Typischerweise wird der Lösung ein pH-Indikator zugesetzt, um den Status der Lösung visuell zu beobachten (bei unterschiedlichen pH-Werten ändern sich die Farben).

 Phenolrot-Natriumsalz (CAS:34487-61-1) wird häufig als pH-Indikator verwendet. Die Lösung ist rot bei neutral, gelb bei sauer und violett bei alkalisch. Die Lösung wird gelb, wenn die Lösung mit Bakterien verunreinigt ist und der pH-Wert sinkt. Wenn Sie dieser fuchsiaroten Lösung Essig hinzufügen, sollte sie gelb werden, damit Freunde mit Krankheiten sie testen können.

pH =1.236.58
BeigeGelbTanFuchsia rotRot

Anthocyane in Früchten fungieren als Indikator; Sie werden cyan (alkalisch), wenn sie unreif sind, und violett (lila), wenn sie reif (sauer) sind.

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