HCY™ Pfu DNA-Polymerase-Kit

HCY™ Pfu DNA-Polymerase-Kit

Da Pfu über eine 3′- bis 5′-Exonukleaseaktivität verfügt, ist die Fehlerwahrscheinlichkeit bei der PCR-Amplifikation stark reduziert und die Genauigkeit ist zehnmal höher als die der Taq-DNA-Polymerase. Die Fehlerrate von Pfu ist viel niedriger als die von Taq, aber auch niedriger als die einiger anderer High-Fidelity-DNA-Polymerasen wie Vent, DeepVent, Pwo, Tli usw. Daher ist Pfu oft die erste Wahl für High-Fidelity-DNA-Polymerasen. Daher wird Pfu oft als kostengünstige High-Fidelity-DNA-Polymerase bevorzugt.
Die HCY™ Pfu-DNA-Polymerase verfügt über eine hohe Amplifikationseffizienz und eine schnelle Amplifikationsgeschwindigkeit (4 kb/min, 8-mal schneller als gewöhnliches Pfu-Enzym), wodurch die Nachteile der geringen Amplifikationseffizienz, der geringen Ausbeute und der langsamen Amplifikationsgeschwindigkeit gewöhnlicher Pfu-Enzyme überwunden und die Ergebnisse erheblich verkürzt werden die Reaktionszeit.

Quelle

HCY™ Pfu-DNA-Polymerase ist eine rekombinante Pfu-DNA-Polymerase, die durch Mutation und Rekombination genetisch verändert und durch Expression in E. coli gereinigt wird.

Verwendung

• High-Fidelity-PCR, Punktmutation, Double-Flat-End-PCR-Klonierung usw.
• Bei den durch das Pfu-Enzym amplifizierten DNA-Fragmenten handelt es sich um Doppel-Flat-End-Fragmente, die für die Doppel-Flat-End-Klonierung, jedoch nicht für die herkömmliche T-Vektor-Klonierung verwendet werden können.
• dUTP und dITP oder Primer, die dUTP und dITP enthalten, können nicht in Pfu-Enzym-vermittelten PCR-Amplifikationsreaktionen verwendet werden.

Aktivierungsdefinition

Unter Verwendung aktivierter Lachssperma-DNA als Matrize/Primer wurde die Aktivität von 10 nmol ganzer Nukleotide, die als säureunlöslich aufgenommen wurden, als 1 Aktivitätseinheit (U) bei 74 °C für 30 Minuten definiert.

Leistung der HCY™ Pfu DNA-Polymerase

HCY™ pfu DNA-Polymeras-Amplifikationsfragmentlängen

• HCY™ pfu DNA Polymeras kann 0.5 kb/1 kb/2 kb/5 kb große Fragmente unterschiedlicher Länge von λDNA (0–5 kb) mit hoher Effizienz amplifizieren.
• M steht für DL10,00 DNA-Marker.

HCY™ Pfu DNA Polymeras Amplifikationsempfindlichkeit

• Amplifikation des 300-bp-Fragments von E. coli unter Zugabe einer Matrizenkonzentration von 0 pg/10 pg/100 pg/1 ng/10 ng/100 ng; Es ist ersichtlich, dass dieses Produkt E. coli-Gene bereits mit einer Template-Menge von 1 ng amplifizieren kann.
• NC zeigt eine Negativkontrolle für die HCY™ Pfu DNA Polymerase-Amplifikation ohne Vorlage an.
• M steht für DL500 DNA-Marker.

HCY™ Pfu DNA Polymeras Amplifikationsgeschwindigkeit

• Die Verlängerungszeit betrug 30 Sek./60 Sek./120 Sek. zur Amplifikation von Zielfragmenten mit einer Größe von 0.5 kb/1 kb/2 kb/5 kb;
• Es ist zu erkennen, dass die Verlängerungszeit von 30 sek. und 120 Sek. kann 2-kb- bzw. 5-kb-DNA-Fragmente gut amplifizieren, was darauf hinweist, dass das PCR-Reaktionssystem mit λ-DNA als Matrize die Verlängerungszeit auf 3 kb/min einstellen kann.
• M steht für DL10,000 DNA-Marker.

Qualitätskontrolle

• Elektrophoretische Reinheit der SDS-PAGE größer als 98 %;
• Funktionstest: Sensitivität, Spezifität, Reproduzierbarkeit der PCR;
• Keine exogene Nukleaseaktivität, keine exogene Endonuklease und Exonukleasekontamination;
• Keine Expression von Wirts-Nukleinsäureresten.

Vorsichtsmaßnahmen: Dieses Produkt dient ausschließlich der wissenschaftlichen Forschung und darf nicht für medizinische oder diagnostische Verfahren bei Menschen oder Tieren oder als Lebensmittel, Kosmetika oder Haushaltsprodukte verwendet werden. Ohne schriftliche Genehmigung, Autorisierung oder Genehmigung darf dieses Produkt nicht hergestellt, zum Verkauf lizenziert, verkauft, importiert oder exportiert werden oder alle damit verbundenen Patente und Marken des Produkts nutzen.

Packliste

Lagerbedingungen

Für eine längere Lagerung bitte bei -20 °C lichtgeschützt lagern. Wenn eine häufige Verwendung erforderlich ist, kann es geteilt und bei 4 °C gelagert werden, um wiederholtes Einfrieren und Auftauen zu vermeiden. Nach dem Auftauen sollte es gut gemischt werden, um die Bildung vieler Luftblasen zu vermeiden.