Pulverförmiges Minimum Essential Medium (MEM)

RPMI-1640 ist ein verbessertes McCoy's 5A-Medium und hat im Vergleich zu anderen Medien eine einzigartige Wirkung, da es das Reduktionsmittel Glutathion und eine hohe Konzentration an Vitaminen enthält. RPMI 1640 enthält Biotin, Vitamin B12 und PABA, die nicht in Eagle's MEM und DMEM enthalten sind. Zusätzlich enthält das Medium sehr hohe Konzentrationen der Vitamine Inosit und Cholin. RPMI 1640-Medium hat sich als geeignet für eine Vielzahl von Säugetierzellen erwiesen, einschließlich HeLa-Zellen, Jurkat-Zellen, MCF-7-Zellen, PC12-Zellen, PBMC-Zellen, Astrozyten und Krebszellen, es ist eines der am häufigsten verwendeten Medien. RPMI 1640 Medium enthält keine Proteine, Lipide oder Wachstumsfaktoren. Daher erfordert es normalerweise 10 % fötales Rinderserum (FBS) als Ergänzung. RPMI 1640 verwendet ein Natriumbicarbonat-Puffersystem (2.0 g/L) und benötigt daher eine Umgebung mit 5-10 % CO2, um den physiologischen pH-Wert aufrechtzuerhalten. Für eine Vielzahl von Zellkulturanwendungen bieten wir RPMI 1640 Modified Medium mit verschiedenen Komponenten und RPMI 1640 Medium mit anpassbaren Komponenten an.

Bestandteile des pulverförmigen RPMI-1640-Mediums

Dieses RPMI-1640-Trockenpulvermedium muss bei der Herstellung mit Natriumbicarbonat ergänzt, auf den pH-Wert eingestellt und filtriert werden. Die detaillierte Formulierungsmethode ist wie folgt:

1. Geben Sie 950 ml destilliertes Wasser in ein Mischgefäß so nahe wie möglich an das Endvolumen.
2. Füge trockenes Medium zu Wasser mit Raumtemperatur (15°C bis 30°C) hinzu und rühre leicht um. Wasser nicht erhitzen.
3. Spülen Sie das Innere der Packung aus, um Pulverrückstände zu entfernen.
4. Fügen Sie dem Medium 29.3 ml einer 75 g/l NaHCO3-Lösung hinzu.
5. Stellen Sie den pH auf 0.2 bis 0.3 Einheiten unter dem gewünschten endgültigen Arbeits-pH ein, indem Sie langsam 1 N NaOH oder 1 N HCl zugeben und rühren. Der pH-Wert kann nach der Filtration um 0.1 bis 0.3 Einheiten ansteigen. Der empfohlene Arbeits-pH-Wert beträgt 7.1-7.4.
6. Endvolumen mit destilliertem Wasser einstellen.
7. Verarbeiten Sie das Medium sofort durch die Membranfiltrationsfunktion eines 0.2-μm-Filters in einen sterilen Behälter unter Verwendung eines Überdrucksystems.